荧光标记蛋白的原理
求问荧光蛋白发光原理？
求问荧光蛋白发光原理？
绿色荧光蛋白是水母中发现的一种发光蛋白。分子量为26kda，由238个氨基酸组成。第65-67位氨基酸形成发光基团，是主要的发光位置。其发光基团的形成无物种特异性，荧光稳定，不依赖任何辅因子或其他底物发光。绿色荧光蛋白(GFP)基因转化宿主细胞后稳定，对大多数宿主的生理没有影响，因此是常用的报告基因。
在某种定义下，荧光蛋白可以说是生物学研究的一场革命——利用荧光蛋白可以观察细胞的活动，标记表达的蛋白质，进行深入的蛋白质组学实验。特别是在癌症研究过程中，荧光蛋白的出现使科学家能够观察到肿瘤细胞的特定活动，如肿瘤细胞的生长、侵袭、转移和再生等。
人鼠实验融合为什么不用同位素标记？
人鼠细胞融合通常会发生染色体丢失，那么为什么不在人鼠实验融合中使用同位素标记呢？
人鼠细胞融合实验采用荧光标记法。人和小鼠细胞融合的实验分为三步:
首先用荧光染料标记抗体:鼠抗体结合发绿色荧光的荧光素，人抗体结合发红色荧光的罗丹明；
第二步，在灭活仙台病毒的诱导下，融合小鼠细胞和人细胞；
最后，将标记抗体添加到融合的人和小鼠细胞中，这些标记抗体与融合细胞膜上的相应抗原结合。
gfp荧光标记实验步骤？
蛋白质材料用荧光染料标记，原液用缓冲液和溶液稀释到适当的浓度。用NaOH调节的N-二羟乙基甘氨酸(0.1mol/L，PH7.5)和NaOH调节的N-二羟乙基甘氨酸(1mol/L，pH9.0~9.5)消化缓冲液20 mmol/L磷酸钠10 mmol/L。
20毫摩尔/升半胱氨酸/盐酸缓冲液(pH7.0)。
为什么植入目的基因的会有抗性？植入后应是破坏了抗性标记基因而失去抗性的啊？
标记基因本身在质粒上(在添加目标基因之前)。一般目标基因插入后，不会破坏标记基因(除非实验需要)。重组DNA完成后会导入受体细胞，但真的进去了吗？这个时候，标记基因就有用了。一般标记基因是抗性基因或者荧光蛋白基因，比如这次是抗生素基因或者标记基因。受体细胞被置于选择培养基中。也就是在培养基中放入抗生素。如果没有抗生素抗性基因或者基因不表达，就无法存活。那又怎样？;活着的是有质粒的细胞。这是要筛选出来的细胞。但还是有问题。例如，可以引入空质粒。如果真的问这个问题，有办法~比如培养它看性状~比如做抗原抗体杂交~