荧光猝灭和荧光淬灭

荧光猝灭和荧光淬灭 fret技术优点?

fret技术优点?

fret技术优点?

荧光共振能量转移(FR:。前者是指在一个分子上标记两个探针,检测分子本身的一些变化,后者是指在两个不同的分子上标记供体和受体探针,检测两个分子之间的相互作用。分子内FR

二氧化碳的荧光效应?

在没有CO2的情况下,当用光照射绿叶时观察到荧光,然后当供给CO2时荧光立即淬灭。二氧化碳爆裂,在三碳植物停止接受光照后的短时间内,释放的二氧化碳量会急剧增加。这种现象被称为二氧化碳爆发。

光照后光合作用立即中断,但光呼吸并不立即停止,所以有残余二氧化碳释放,所以一般认为二氧化碳爆发是光呼吸的残余顺序。

荧光材料有哪些?

荧光材料包括无机荧光材料和有机荧光材料。

1.无机荧光材料

代表性的无机荧光材料有稀土离子发光和稀土荧光材料,具有吸收能力强、转化率高等优点。稀土配合物中心离子的窄带发射有利于全色显示,其物理化学性质稳定。稀土离子具有丰富的能级和4f电子跃迁特性,使稀土成为发光的宝库,为高科技领域特别是信息和通信领域提供性能优越的发光材料。常见的无机荧光材料以碱土金属(如ZnS,CaS)铝酸盐的硫化物(SrAl2O4,CaAl2O4,BaAl2O4)为发光基质,稀土镧系元素[铕(

闪光显微镜的使用?

1.用窗帘遮住光线,关掉室内的灯,取下荧光显微镜的防尘罩,保证荧光显微镜的灯室通风良好,无遮盖。安装水银灯灯箱并转动。灯箱环上的杠杆将灯箱与镜臂连接起来。

2.将汞灯灯箱的电源插头插入荧光粉箱后面的插座,然后将荧光粉箱的插头插入220V外接电源。

3.打开荧光显微镜电源开关,电压表显示电源电压。如果电源电压的波动不超过额定电压的5%,可以按下启动开关点燃汞灯。如果因为天气冷或者电压不稳导致汞灯一次没有点燃,可以按几次。当超高压汞灯的电弧达到稳定状态和Zda的发光效率时,就可以开始工作了。

4、灯泡的调整:

①选择一个标本,放在荧光显微镜的载物台上。

(2)转动镜臂上的聚光镜旋钮,将聚光镜移出光路,转动滤色片组转换手轮,将紫光(V)或蓝光(B)或绿光(G)激发的滤色片组转入光路,将25°荧光物镜转入光路。

③调节粗调和微调手轮,使样本图像清晰聚焦。

(4)前后推动垂直照明器右侧聚光镜的调焦推杆,使视场光阑成像清晰,转动视场光阑杆缩小视场光阑,调节视场光阑调节螺丝使视场光阑居中,然后打开视场光阑至Zda。

⑤转动镜臂上的聚光镜旋钮,将聚光镜移入光路,前后调节灯箱上的聚光镜手柄,使汞灯的弧形在视野内清晰成像。

⑥调节灯箱上灯泡的水平调节螺丝和垂直调节螺丝,使汞灯的弧居中。

⑦调节反射镜的水平调节螺钉和垂直调节螺钉,将光源的反射像与汞灯的弧光分开。

⑧转动聚光镜的旋钮,将聚光镜移出光路,视野将得到均匀的照明。

5、荧光观察:

①将荧光染色的样本放在荧光显微镜载物台上。

②将10场物镜或25x荧光物镜转到光路中,调节载物台手轮,将样品移入光路中。

(3)转动滤光片转换拨轮,将荧光染色样品所需的激发滤光片组转入光路。激发滤波器组编号刻在滤波器组转换拨轮上。滤光片选择正确与否是荧光显微镜正确应用的关键。当选择过滤器,斯托克斯 必须遵守定律:激发滤光片的透射波长lt和二向色分束器的透射波长lt阻挡滤光片的透射波长。

(4)调整粗手轮。当荧光图像的轮廓清晰可见时,使用微调手轮聚焦,直到看到清晰的荧光图像。

⑤当需要获得强荧光图像时,可以转动聚光镜旋钮,将聚光镜移动到光路中,可以获得更亮的荧光图像。

⑥用40x或100x荧光物镜观察时,应在标本与物镜之间加入甘油,油中不应有影响观察的气泡或杂质。使用时,可将甘油慢慢浸泡一会儿,然后轻轻左右旋转物镜转换器,即可消除气泡。

6.荧光显微照相术

因为荧光图像一般比明场观察暗很多,所以需要拍荧光显微照片。长时间曝光,曝光时应注意避免荧光显微镜的振动。为了缩短曝光时间,可以选择低倍率的摄影目镜或高感光度的摄影胶片,如ASA200或DIN24以上。

荧光显微摄影技术对于记录荧光图像是非常必要的。因为荧光容易褪色变弱,所以需要立即记录结果。方法与普通显微摄影基本相同。由于紫外光对荧光有很大的猝灭作用,如FITC标记物,用紫外光照射30 s,荧光亮度下降50%,因此,如果曝光速度过慢,荧光图像无法拍摄。一般来说,研究型荧光显微镜都有半自动或全自动显微照相系统。

7、荧光图像记录方法

荧光显微镜看到的荧光图像,一个是形态特征,另一个是荧光的颜色和亮度。在判断结果的时候,一定要把两者结合起来综合判断。根据主观指标,即工人的观察记录结果。;视力。作为一般定性观察,基本可靠。

8.荧光显微镜使用完毕后,关闭所有电源,清洗镜头和载物台,待灯室冷却至室温后,用防尘罩盖住显微镜,并做好使用记录。

荧光显微镜使用中的注意事项

1、严格按照荧光显微镜说明书的要求,不要随意改变程序。

2、荧光显微镜应在暗室中检查。进入暗室后,接通电源,点燃超高压汞灯5 ~ 15 min。光源发出的强光稳定后,眼睛完全可以适应暗室,然后开始观察标本。

3、为防止紫外线对眼睛的伤害,调节光源时应戴防护眼镜。

4.每次检查1 ~ 2小时为宜。超过90min时,超高压汞灯的发光强度逐渐减弱,荧光减弱的样品经紫外线照射3 ~ 5min后荧光明显减弱。因此,Z不应超过2 ~ 3小时。

5、荧光显微镜光源寿命有限,标本应集中检验,以节省时间和保护光源。天热时要加电风扇降温,新换灯泡的使用时间要从头记录。当灯熄灭后想再次使用时,必须充分冷却后才能点燃。避免一天多次点亮光源。

6.染色后立即观察标本,时间长了荧光会逐渐减弱。如果将样品储存在聚乙烯塑料袋中,可以延迟荧光衰减时间,并防止密封剂蒸发。

7.判断荧光亮度的标准:一般分为四级,即 "- "意味着没有或可见微弱荧光。 " "意味着只能看到可见的荧光。 " "表示可见明亮的荧光。 " "意味着可以看到耀眼的荧光。