dna提取中获取上清液的方法
DNase污染如何消除？
DNase污染如何消除？
方法:
1.在37度恒温下用DNAs
DNA标本制作方法？
1收集材料。这种方法需要聚苯乙烯泡沫球、针线、颜料和牙签。
2给珠子上色。选择六种颜色代表糖、磷酸和四种碱。你可以随意选择。你需要画16 糖和糖，14 磷酸 和4个彩球(代表胞嘧啶、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和腺嘌呤)。一个球可以选择白色，所以不需要涂。你不 不要用油漆球糖 ，节省了很多时间。
3搭配好碱基。等颜料干了之后，再把各个底的颜色排列好，搭配起来。胞嘧啶和鸟嘌呤，胸腺嘧啶和腺嘌呤必须分别是一对。颜色的顺序不重要，只要搭配好就行。配对的球用牙签从中间穿过，两端留有空隙，然后就可以插入DNA链了。
4做一个双螺旋。用针线缝15个线团，一端打结，另一端穿过珠子。 糖 球和 磷酸 球相邻地放在一起，从而形成15个球长的DNA链。这里的糖比磷酸多。确保两条长DNA链的糖和磷酸处于相同的顺序。将一根线穿过一个糖和磷酸的球，并系住一端以防止球掉落。
5将碱基对放在长链上。在两个糖球上插一串牙签。只能插入糖里，这是DNA的现实。确保牙签插入牢固，这样它不会 不容易掉下来。
6扭曲DNA链。插入所有牙签后，逆时针扭转DNA长链，模仿经典的DNA双螺旋结构。你 我们完成了！
如何提取DNA粗提和精提的方法？
首先，DNA提取(粗提取)
1.酚提取法:先用酶K和SDS破碎细胞，然后消化蛋白，再用大小为100-150kb的酚和酚氯DNA。
2.甲酰胺解聚法:如上破碎细胞，然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合体，再透析获得DNA，获得约200 KB的DNA。
3.玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞，将裂解液铺在乙醇上，然后用钩状或U形玻璃棒在界面处轻轻搅拌，DNA沉淀缠绕在玻璃棒上。产生的DNA约为80kb。
4.异丙醇沉淀法:与第一种方法基本相同，只是用2倍体积的异丙醇代替乙醇，可以去除小分子RNA(溶于异丙醇)。
5.表面活性剂的快速制备方法:用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞，然后用蛋白酶K或苯酚去除蛋白质，用乙醇沉淀或透析。
6.加热法快速制备:96℃加热在-100℃保温五分钟，然后离心后取上清液，可用于PCR反应。
7.碱变性快速制备:先用NaOH 20分钟，再加入HCI中和，离心后取上清液，含少量DNA。
二、DNA的浓缩(精制提取)
1.固体聚乙二醇(PEG)的浓缩:用透析袋将PEG加至适量。
2.丁醇提取和浓缩:DNA溶液中的水可以分配到正丁醇或仲丁醇中，而DNA不会。因此，重复几次可以显著减少DNA体积。
3.乙醇或异丙醇沉淀:(1)需要阳离子盐，NaAc最常用，NaCl对含SDS的样品好，NH4Ac对去除dNTP好。PiCl能很好地沉淀RNA，但在逆转录前不能使用。(2)沉淀温度和时间；0℃-4℃，12000g，10分钟，小于100 BP的DNA需要超速离心。
4.精胺沉淀法:与DNA结合后，DNA结构凝聚沉淀，需要在无盐或低盐溶液中。