柱层析的操作步骤
硅胶柱层析以后要分析用什么方法？
硅胶柱层析以后要分析用什么方法？
硅胶柱色谱的常规方法
称重。200-300目硅胶，重量为样品量的30-70倍；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶h，干硅胶的表观密度约为0.4，所以称40g硅胶，用烧杯量100ml。
2.搅拌成匀浆。加入两倍干硅胶体积的溶剂，用玻璃棒搅拌。如果洗脱液是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系，用石油醚混合；如果洗脱剂是氯仿/乙醇系统，用氯仿混合。如果可以 不能搅拌成匀浆，说明溶剂中水分含量过高，尤其是乙酸乙酯/丙酮。如果分配色谱不与水混合，必须事先用无水硫酸钠干燥很长时间。用无水氯化钙干燥氯仿以除去1%的乙醇。如果样品对酸敏感，氯仿系统不能用于通过色谱柱。
3.列加载。用棉花代替海沙塞住柱底，加入约1/3体积的石油醚(氯仿)，装上储液球，打开柱下活塞，将匀浆一次性倒入储液球中。随着沉降，一些硅胶会浸入储液球中，用石油醚(氯仿)洗入柱中。
4.压实。沉降后，加入更多石油醚，用双球或气泵加压至流速恒定。柱床被压缩至约9/10体积。这一步无论常压柱还是加压柱都要进行，这样可以大大提高分离度，避免过柱时由于柱床收缩而产生的开裂。
5.样本。干法或湿法都可以。海沙是不必要的。上样后，加入一些洗脱液，然后在硅胶表面塞一团脱脂棉。然后你就可以放心的加入大量的洗脱液，不用清洗硅胶表面。
6.列传递和收集。柱层析实际上是扩散和分离的权衡。太低的洗脱强度不好，建议梯度洗脱。收集的例子:10毫克装载，1克硅胶H，0.5毫升收集一个馏分；上样1-2g，硅胶50g(200-300目)，收集20-50ml馏分。
7.检测。要使用更特殊的喷剂，如果只使用紫外线灯，会损失更多的产品，紫外线的敏感度一般比喷剂低1-2个数量级。
8.发送音乐。收集到的产物是旋转干燥的，通常在送到光谱前需要重结晶。如果样品太小或者是液体，可以通过一个小的凝胶柱作为最后的净化手段，然后再发送光谱。所谓的 硅胶 可以去除氢谱中约1.5ppm的峰。硅胶柱色谱的原理硅胶色谱的分离原理是根据物质在硅胶上不同的吸附力进行分离。一般极性较高的物质容易被硅胶吸附，极性较低的物质不容易被硅胶吸附。整个色谱过程就是吸附、解吸、再吸附、再解吸。
氨基酸如何鉴定？高中阶段的？
所有带游离氨基的氨基酸水溶液与水合茚三酮反应都能生成一种紫色化合物，这种化合物非常灵敏，是鉴别氨基酸最简单的氨基酸，无一例外地被使用。茚三酮是显色剂。如果反应在溶液中进行，得到的紫色溶液在570 nm处有强吸收峰。
色谱法，又称色谱法，是一种物理分离方法。利用混合物中各组分的物理化学性质的差异(如吸附力、分子形状和大小、分子亲和力、分配系数等。)，组分在固定相和流动相中不同程度的分布，组分以不同的速度运动，从而获得有效的分离。:纸色谱法、薄层色谱法、柱色谱法等。
分离机理包括:分配色谱法、吸附色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法和亲和色谱法。
纸层析是以滤纸为惰性载体的分配层析，展开剂由有机溶剂和水组成。滤纸纤维上的羟基具有亲水性，滤纸上的水吸附在纤维素的纤维之间，形成固定相。当有机溶剂(流动相)沿纸流过色谱点时，色谱点的溶质在水相和有机相之间不断分布。
因为溶质中各组分的分配系数和移动速率不同，所以可以相互分离。