乳胶凝集试验

间接胶乳凝集试验的原理?

间接胶乳凝集试验的原理?

实验原理:所用乳胶系人工合成的聚苯乙烯乳胶,它是由0.6~0.7μm球形小颗粒组成的胶体溶液,该胶体溶液对高分子蛋白之类的物质具有良好的吸附性能。故在试验时,以其为载体,将炭疽抗体球蛋白吸附在乳胶颗粒表面上,制成所谓的炭疽乳胶诊断血清,当与特异抗原相遇时,乳胶颗粒即被动凝集在一起,在液滴中形成肉眼明显可见的乳胶凝集块,即为阳性反应,如仍为均匀混浊的乳状悬液,则为阴性反应。

乳胶法胶体金法金标法有什么区别?

1、原理不同:
普通聚苯乙烯乳胶和抗体的结合是无选择性的物理静电吸附,抗体很难结合到乳胶表面,即使致敏上的抗体也容易从乳胶微球上脱落或者变性失活,而使用多肽缩合剂或交联剂则操作过程繁琐、耗时。
胶体金法是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。
2、应用不同:
胶体金也是免疫电镜技术中较为理想的免疫标记物。胶体金技术具有方便快捷、特异敏感、稳定性强、不需要特殊设备和试剂、结果判断直观等优点, 因而特别适合于广大基层检验人员以及大批量检测和大面积普查等, 具有巨大的发展潜力和广阔的应用前景。
乳胶凝集法具有独特优点: 不需要特殊仪器、肉眼判断、操作简便、不需要专门培训;检测时间短,一般为 2 min;价格低廉,检测单份血清样品的成本比其它血清学和病原学方法低得多;适于现场检测等,在临床检验中被广泛应用。
3、载体不同:
乳胶凝集法是以乳胶颗粒作为载体的一种间接凝集试验。即吸附可溶性抗原于其表面,特异性抗体与之结合后,可产生凝集反应。
胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。

乳胶法和酶免法的区别?

乳胶法将抗原或抗体吸附在乳胶上,抗原和抗体发生反应后会产生乳胶颗粒凝集反应;而酶免法的将抗原或抗体吸附有酶,发生反应后酶催化底物产生颜色变化,根据颜色深浅测定抗原或抗体浓度,两者相比,酶免法准确度更高。

凝溶反应?

凝集反应是一种血清学反应。颗粒性抗原(完整的病原微生物或红细胞等)与相应抗体结合,在有电解质存在的条件下,经过一定时间,出现肉眼可见的凝集小块。参与凝集反应的抗原称为凝集原,抗体称为凝集素。可分为直接凝集反应和间接凝集反应两类。玻片法是一种定性试验方法。可用已知抗体来检测未知抗原。若鉴定新分离的菌种时,可取已知抗体滴加在玻片上,将待检菌液一滴与其混匀。
中文名
凝集反应
外文名
agglutination test
类型
血清学反应
反应
抗原抗体
分类
直接凝集反应和间接凝集反应
分类
直接凝集反应 颗粒状抗原(如细菌、红细胞等)与相应抗体直接结合所出现的凝集现象。分为玻片法和试管法。数分钟后,如出现肉眼可见的凝集现象,为阳性反应。该法简便快速,除鉴定菌种外,尚可用于菌种分型、测定人类红细胞的ABO血型等。试管法是一种定量试验的经典方法。可用已知抗原来检测受检血清中有无某抗体及抗体的含量。用来协助临床诊断或供流行病学调查研究。操作时,将待检血清用生理盐水连续成倍稀释,然后加入等量抗原,最高稀释度仍有凝集现象者,为血清的效价,也称滴度,以表示血清中抗体的相对含量。诊断伤寒、副伤寒病的肥达氏反应(Widaltest)、布氏病的瑞特氏反应(Wright test)均属定量凝集反应。
间接凝集反应 将可溶性抗原(或抗体)先吸附于一种与免疫无关的、一定大小的颗粒状载体的表面,然后与相应抗体(或抗原)作用。在有电介质存在的适宜条件下,即可发生凝集,称为间接凝集反应。用做载体的微球可用天然的微粒性物质,如人(O型)和动物(绵羊、家兔等)的红细胞、活性炭颗粒或硅酸铝颗粒等;也可用人工合成或天然高分子材料制成,如聚苯乙烯胶乳微球等。由于载体颗粒增大了可溶性抗原的反应面积,当颗粒上的抗原与微量抗体结合后,就足以出现肉眼可见的反应,敏感性比直接凝集反应高得多。