大肠杆菌平板检测方法基本步骤

为什么平板划线法和稀释涂布平板法都可以纯化大肠杆菌?

为什么平板划线法和稀释涂布平板法都可以纯化大肠杆菌?

一、平板划线分离法 由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料,在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线,微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少,并逐步分散开来,如果划线适宜的话,微生物能一一分散,经培养后,可在平板表面得到单菌落。
二、稀释倒平板法 先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释(如 1 ∶ 10 、 1 ∶ 100 、 1 ∶ 1000 、 1 ∶ 10000 …),然后分别取不同稀释液少许,与已溶化并冷却至 45 ℃左右的琼脂培养基混合,摇匀后,倾入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板,保温培养一定时间即可出出菌落。
如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落,这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。
随后挑取该单个菌落,或重复以上操作数次,便可得到纯培养。
稀释涂布法: 优点:可以计数,可以观察菌落特征。
缺点:吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延。
一般用于平板培养基的回收率计数!! 稀释混合平板法: 优点:可以计数,吸收量为1ml,较方便。
优点:不能观察菌落特征。
一般用于菌落总数的计数!! 平板划线法: 优点:可以观察菌落特征,对混合菌进行分离!!缺点:不能计数

大肠杆菌在vrba平板上的菌落形态?

根据现行国标《GB 4789.3-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》,大肠菌群在VRBA平板上的典型菌落为—— “典型菌落为紫红色,菌落周围有红色的胆盐沉淀环,菌落直径为0.5mm或更大”。

大肠菌群平板计数法怎么计算?

典型和可疑菌落, 选择菌落数在15~150之间的平板,分别计数平板上出现的典型和可疑大肠菌群菌落。? 典型菌落为紫红色,菌落周围有胆盐与酸形成的沉淀环,菌落直径为0.5mm或更大。
证实试验? 从VRBA平板上挑取10个不同类型的典型和可疑菌落,分别移种于BGLB肉汤管内,进行证实试验。? BGLB肉汤管产气者,所对应的菌落即为大肠菌群阳性菌落。
结果报告? 经最后证实为大肠菌群阳性的BGLB管的百分比乘以计数的平板菌落数,再乘以稀释倍数,即为每g (mL)样品中大肠菌群数 。? 例:10 -4 样品稀释液1ml在VRBA平板上有100个典型和可疑菌落,挑取10个接种BGLB肉汤,证实6个为阳性。则样品大肠菌群数为:100×6/10×10 -4 /g(mL)6.0×10 5 cfu/g(mL)
注意事项? 1、选择稀释度时,应以对含菌量的估计为依据,具体情况所选稀释度不同。? 2、两种检测方法的比较 ? 平板计数法相对于MPN法来说,检验结果更精确。? 适合用于污染比较严重的样品。