培养基灭菌后ph下降了很多怎么办
培养基试管灭菌后有沉淀怎么回事？
培养基试管灭菌后有沉淀怎么回事？
灭菌消毒时的过高温度下降常对固体培养基造成不良影响到。如：
1.再出现混浊和经过时间(天然培养基含有直接加热积累出大分子聚集活性肽共聚物；液体培养基中ny、4mg、zn、zn、ni、glottic等阳性阳离子与培养基中的可溶解磷酸盐共热去沉淀)。
2.营养成份完全破坏或彻底改变(酸度高比较低时少量淀粉、庶糖、乳糖含量或鱼胶粉灭菌时间过程易水解;溶液ph7.5,0.1抗拉强度rm消毒灭菌5min，单糖严重破坏20%，芝麻糖破坏50%，若液体培养基中有盐类共存，葡糖糖转变过程成酮单糖，培养液由淡黄色不再黑褐色，破坏更为严重。
时液体培养基中的葡萄糖、磷酸氢二钠、磷酸盐类在0.115.0mpa高温灭菌10min以上可不会产生对其他微生物生长的植物的有一种可抑制物。
4.蒸汽加热高温灭菌后培养基ph值大幅下降0.1--0.3。
5.蒸汽灭菌的过程会上升冷凝管，明显降低培养基化学成份浓度高。对于前四种不良造成影响，可一体式低压控制高温灭菌(如在0.056最大工作压力、15min高温灭菌葡糖糖溶液中)，或将液体培养基四种化学成份分别消毒灭菌，临用前无菌混合(如磷酸盐与ny、6mg、cr、fe 、zn等阳性阳离子溶液)的几种方法，特殊状况可一体式组间灭菌处理、滤除高效除菌(如b族维生素溶液)。重工业再发酵中采用三的连续压力变化高温灭菌法(135--140摄氏度，5--15s)和连续或蒸法。
废弃培养基的处理方法？
不使用后的琼脂培养基是不可以直接弃于的，原因之一是里的如前所述活菌，会破坏环境。处理的四种方法最好是用产生蒸汽高温灭菌的四种方法消毒灭菌处理，杀了固体培养基里的所有各种微生物，然后再遗弃，这样就可以避免出现造成环境污染。
也是出于维护生态环境的均衡考虑到，有活菌的液体培养基不也能直接遗弃。
液体培养基灭菌方法？
可采用三一次管网高温灭菌。供热灭菌是利用超高温使芽孢蛋白量丧失生育能力，从而放弃活性，提升到灭菌的目的。
供热管网灭菌处理常一体式寒湿灭菌处理的几种方法对系统培养植料开展灭菌，因为热蒸气的穿透力，碳水化合物的冰的熔点随水分的含量的増加而明显降低。
根据采用不同的仪器、温度、时间及压力更大指标值分为高压蒸汽灭菌消毒、减压蒸馏高温灭菌、常压间隔性高温灭菌、再发酵消毒杀菌（巴氏杀菌）等方法。
总结配置培养基的注意事项？
这里主要归纳总结一般情况下的液体培养基材料配制最关键，因为培养基的配制使用的非常重要，从一就就该避免出现异常的经常出现，主要有以下几个诸多方面。
(1)溶化：一般应放上玻璃器具或瓷质齐内。15克黄油蒸溜水,隔水持续加热以促其完全溶解,持续加热时应经常搅拌均匀,可以防止焦结,待其完全溶解后补充部分多余的水分。
在使用干燥菌液时,先将蒸馏水按定量微沸后其它容器中,然后称取一定量培养基干粉放入水水底,加入水10—15min,搅拌均匀,振荡,或延长段里以促进可溶解,一般不要热,前提时加热,但把时间不宜长时间,室内的温度不宜过高,避免某些营养素被被破坏.
(2)测量酸碱性(调节ph)：液体培养基需要有适当的碱度.因此测定ph值是培养基配制方法时间过程中的重要步骤最有影响力,测定ph值的基础标准摄氏度为25士2℃.调节ph值可用无菌操作的1kartellnaoh溶液或10%碳酸钾硫酸铜溶液、1maxi-cosi稀盐酸混合溶液.当可以调节缓冲液的碱度时,宜用6magis磷酸盐或10moll氢氧化钾溶液.灭菌后的碱度会比消毒灭菌前的溶液ph升高或大大降低,一般高压蒸汽灭菌前琼脂培养基的ph会比最终碱度调高0.2左右,高温灭菌后基本合适。
因此对液体培养基、缓冲液、试剂盒在消毒灭菌前后的ph值均对其测定结果,并记着每次酸碱度的测定方法因为,有助于积累最终数据考察分析每种液体培养基、流动相、试剂对灭菌消毒程序的不耐受,从而具体指导消毒灭菌前碱度的可以调节.干燥固体培养基一般已校正过ph值,总用时也需要再验证结果.测定方法时,一般用甲基橙滴入培养基观察了解其其他颜色的发生变化,或用碱度计校正,如与所需酸碱度不符合,可用以上的酸或氢氧化钠以此测量.调整碱度后要再加热滤除,使液体培养基澄清谣言.
(3)液体培养基的包装好：大批量材料配制时使用的自动器接须经再校准和确认信息.每次使用的前后,均要对器接的管路系统进行冲冼,在小包装无菌状态液体培养基前,则要采用三无菌环境橡胶管.
液态固体培养基一般分装在150ml、500ml烧瓶中,灭菌处理后根据需要小包装平皿或ivf.
平皿：倾注平皿,应在无菌室中置放3—4h,如用泡沫塑料平皿须在35℃co2培养箱中平置30—60min.让水蒸发的蒸发。
竖直方向：制备过程低层光滑平面小包装于试管,约占总容积1/5,灭菌处理后趁热斜把细胶头滴管和长杆上,使成斜度,分装使特别注意管口和木塞上勿沾有固体培养基,如沾有菌液应用方面布抹掉,以防止受到污染.
洋房6倾斜面：制备过程高层人士斜面袋装于ivf,约占做试管婴儿内部容积的1/3,灭菌后放凉置于成高层短光滑平面,待其凝结后应用方面。
袋装好的菌液或缓冲溶液等及时密封后需要在调配出当天(12h内最佳)对其灭菌处理处理.粘稠液体、固体状液体培养基一般在形成高压灭前小包装,约装促排450l的1/3,在灭菌后还要加其他其他成分的液态、固体状固体培养基,消毒灭菌后再分装于灭菌处理促排或锥形瓶中.
固体培养基的高温灭菌：琼脂培养基的消毒灭菌多采用传统高压蒸汽消毒灭菌,各种琼脂培养基的高温灭菌时间点和压力,按其其他成分不同而定.普通琼脂培养基采用121℃、103.425kpa灭菌消毒15min,但其它容器和装量较大时,应更长至40min.含糖液体培养基115℃、68.855kpa灭菌消毒5min.含糖、血清、两个鸡蛋等固体培养基可用向下流动蒸气及血清凝固器80—100℃、15min,连续3d技术,组间高温灭菌.球蛋白或组织间隙,采用三全身症状56—58温浴4h,连续5—6d高温灭菌,一些遇超高温即被破坏的类物质如尿素、腹腔积液等,可用各种细菌空气过滤器,过滤出来除菌功能.
高温灭菌应严格按照安全操作规程执行,必须逐渐加热,彻底不能排除高压灭菌器内的干燥的空气,再逐渐升压变压器保待预定的的多重压力和段里,超过全部杀灭病菌其他微生物.以上的高温灭菌段里和摄氏度要细致工作验证结果确认,如类型琼脂培养基均匀混合在一起高温灭菌但宜采用115℃、68.85kpa灭菌15min为好