酶切和连接电泳图对比
从细胞中提取质粒然后电泳，为什么一种质粒可以跑出两条带？
从细胞中提取质粒然后电泳，为什么一种质粒可以跑出两条带？
正常现象，没有酶切的质粒有两种形式，环状和超螺旋。超螺旋质粒跑在前面，环状质粒在后面，所以它可以 不能用bp大小来衡量。普通凝胶电泳只能区分线性化的质粒。未知答案是否令人满意。
怎么单酶切。单酶切后，怎么把目的基因连到已经酶切过的载体上，如何防止自连？
你 最好过夜进行单酶消化，并尽可能长时间地进行电泳。如果有带，说明几乎全切。如果怕不安全，可以回收净化这个带，用净化过的连接，让它不那么容易自连。
质粒dna的酶切与琼脂糖电泳鉴定实验样品有3条带是怎么回事？
我不 我不知道你在说什么。;我们在跑。如果它 s纯质粒，三带太正常了。一般来说，如果它 这是一个高浓度的纯质粒三带，分别是闭环、开环和线性质粒。如果它 酶切后的s三带，先看几个酶切，查图谱，看看这个位点在质粒中出现了多少次。一般来说，工具质粒不会。;t在同一位点出现两次以上，但通常插入的片段可能有同源点。
当然也有可能是酶没有被完全切割。
二硫键酶切原理？
对角电泳是定位二硫键的经典方法。这项技术包括:(1)胃蛋白酶消化未还原的蛋白质；(2)第一次电泳在酸性pH 6.5的条件下进行，酶解产物的肽段将根据其大小和电荷进行分离；(3)将滤纸暴露在过氧甲酸(CHOOOH)的蒸气中，使二硫键断裂，进一步氧化成磺酸基团，氧化后的半胱氨酸称为磺基丙氨酸；(4)将滤纸旋转90度，在与第一维电泳完全相同的条件下进行第二维电泳。没有二硫键的肽在没有酸作用的二维电泳中将具有相等的迁移率，并且将位于对角线上。那些含有二硫键的肽段在二维电泳中会被酸氧化，肽段的大小和负电荷会发生变化，导致迁移率不同，会偏离对角线。肽点可以通过茚三酮显色来确定。含有磺基丙氨酸的肽段将被单独除去。进行氨基酸序列分析以推断二硫键的位置。如果蛋白质中还有其他未形成二硫键的半胱氨酸，应在酶解前用碘乙酰胺封闭。此外，蛋氨酸和色氨酸也会被氧化，这可能会增加分析的复杂性。