薄层层析操作步骤
薄层分析的原理是什么？
薄层层析的原理是什么？
薄层分析原理
基本原理：吸附薄层色谱法利用不同成分对同一吸附剂的不同吸附能力，在流动相通过固定相的过程中产生持续吸附、解吸附、再吸附和再吸附，从而达到相互分离各成分的目的。
在微分散的固体或附着在固体表面的液体作为固定相，将液体（不与上述液体混合）或气体作为移动相系统，使混合物中的成分保持到两相分布的平衡状态，使用固定相亲和不同力引起的移动速度差，相互分离的定性和定量分析方法称为层析，也称为色谱法。根据移动相的不同类型，可分为液体层析和气体层析。
薄层分析的原理是什么？
基本原理：吸附薄层色谱法利用不同成分对同一吸附剂的不同吸附能力，在流动相通过固定相的过程中产生持续吸附、解吸附、再吸附和再吸附，从而达到相互分离各成分的目的。
在微分散的固体或附着在固体表面的液体作为固定相，将液体（不与上述液体混合）或气体作为移动相系统，使混合物中的成分保持到两相分布的平衡状态，使用固定相亲和不同力引起的移动速度差，相互分离的定性和定量分析方法称为层析，也称为色谱法。根据移动相的不同类型，可分为液体层析和气体层析。
硅胶、活性炭、氧化铝、离子交换树脂、离子交换纤维等。用于固定相，或者适当的液体附着在硅藻土和纤维素等非活性载体上，也可以使用其他物质。将微粉状物质作为固定相放入细长圆筒中的分析称为柱分析（column chromatogra-phy），在玻璃板上涂一层薄而均匀的材料作为固定相称为薄层分析（thin-layer chromatography），后者可以分析与用滤纸作为固定相的纸的上层，即在固定相的一端，点上微量试料，使移动相(液体)从此端渗入密闭容器，移动到另一端。
通过这个扩展操作，每个组件都以斑点的形式移动到各自的位置，然后根据它们Rf确定值的测定。当斑点不易被肉眼观察时，可采用适当的显色剂，或采用紫外线灯下产生荧光的方法进行观察。也可以在第一个移动相扩展后用另一个移动相扩展(此时扩展方向应垂直于原始方向)，使每个组件完全分离的双向层析（two-dimensional chromatography）。分离后，切掉斑点位置的固定相，从试验材料中提取物质进行定量分析。
然而，对于制备和定量，柱层分析更合适。在柱层分析中，移动相从添加测试材料的一端展开到另一端，然后继续展开，使每个成分和移动相分别溶解在柱外，这就是所谓的洗涤和提升分析（elution chromatography）。
根据固定相与溶质（试验材料）之间的亲和力的差异，层析可分为三种类型：吸附型、分配型和离子交换型（离子交换层析）。但这不是很严格。有时它是常见的中间类型。此外，最近还应用了亲和分析，即将类似于基质的化合物（通常是共价键）结合到固定相上，然后利用其特定的亲和力沉淀与其对应的特定酶或蛋白质。