液氮保存细胞的原理

冻存管存放标本注意什么?

冻存管存放标本注意什么?

1、使用冻存管储存样本时,严格要求应把冻存管放入液氮的气相层或冰箱中保存!如果冻存管储存于液氮液体中,液氮有一定几率会渗入冻存管内部,复苏时液氮气化导致管内外压力不平衡,这样极易造成冻存管的炸裂,并具有生物危害性。
2、操作冻存管复苏,全程使用安全防护设备,建议穿实验服、戴棉质手套且在安全的实验台上进行操作。条件允许情况下,请佩戴护目镜或防护面罩。由于夏季室内温度会高于冬季,请格外小心。
3、冻存细胞储存过程中,冻存管的冷冻温度须均匀。不均匀的受冻将会导致冰塞的产生,冰塞会抑制两侧的液体温度传递进而产生危险的高压力并导致冻存管受损。
4、冻存的样本量不要超过冻存管要求的最大工作体积。

为什么液氮罐中的细胞要快速复苏?

1.我们用的是盒子装的,没见过你说的这种,你可以电话咨询厂家或者有经验的老师;
2.冻存管内加入细胞后一般放-20℃一到两个小时,然后转到-80℃放置6小时或者过夜,最后再放入液氮中,冻存管只要拧紧盖子就行,不需要其他处理;
3.从液氮罐中取出细胞后,要迅速在37℃水浴中融化细胞悬液,进行细胞复苏.

培养板里的细胞如何运输?

一、冷冻储存运输
这是一种利用特殊容器内盛液氮或干冰的运输方法。保存效果较好,但缺点是比较麻烦,不宜长时间运输,多需空运,代价较大。
1、干冰运输:较为常用,也很保险,成本不算高,但航空禁运,如果本人携带,汽车、火车均可,20h有5kg干冰足矣,但为保险起见10kg左右干冰为好,成本:泡沫保温箱20元 干冰8元/kg*10kg100元;
2、液氮运输:短途首选,长途不够安全,航空不行,铁路好像要过安检,汽运较颠簸容易泄露,运输用的小型液氮罐也比较贵,国产的也至少要几百元;
二、充液法
此种方法较为简单。一般选择生长良好的细胞,以生长1/3~1/2瓶底壁为宜,去掉旧培养液,补充新的培养液至瓶颈部,保留微量空气,拧紧瓶盖,并用胶带密封,放在一运送盒内,用棉花等做防震防压处理。运输时间需4~5天,一般放在贴身口袋即可,到达目的地后倒出多余的培养液,只需保留维持生长所需的培养液置37℃培养,次日传代。如果在市内运输或仅需数小时运输路程,也可将细胞附着面朝上,或把培养液全部倒掉放在胸部口袋运送。靠附着于细胞表面的培养液,可使细胞短时间不受损。