印迹杂交技术要收2次费用嘛

wb详细原理及步骤?

wb详细原理及步骤?

一、WB实验的基本原理:

蛋白质W

做分子杂交用的那个SSC溶液叫什么?

SSC(生理盐水柠檬酸钠)缓冲液是分子生物学中最标准的印迹和杂交溶液,含有氯化钠、柠檬酸钠、Trizma碱等成分。20倍SSC分子生物学浓缩缓冲液是各种杂交实验中变性和清洗常用的浓缩缓冲液(pH 7.2)。

wb技术的原理及意义?

实验原理

WB是将蛋白质转移到膜上,然后用抗体检测的方法。对于已知的表达蛋白,可以用相应的抗体作为一抗进行检测,对于新基因的表达产物,可以用融合部分的抗体进行检测。

类似于Southern或Northern杂交,WB使用聚丙烯酰胺凝胶电泳,检测的对象是蛋白质探针和探针是抗体,而 "颜色发展与应用使用标记的第二抗体。

将PAGE分离的蛋白质样品转移到固相载体(如硝酸纤维素膜)上,固相载体以非共价键的形式吸附蛋白质,电泳分离的多肽种类和生物活性可保持不变。以固相载体上的蛋白质或多肽为抗原,与相应的抗体反应,再与酶或同位素标记的第二抗体反应,通过电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白质成分,通过底物显色或放射自显影进行检测。这项技术也广泛用于检测蛋白质水平的表达。