柱层析的原理是什么如何选择溶剂

柱层析法的原理?

柱层析法的原理?

柱层析原理:
柱层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而使各组分分离。一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附。当采用溶剂洗脱时,发生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的过程,吸附力较强的组分,移动的距离小,后出柱;吸附力较弱的组分,移动的距离大,先出柱。
硅胶柱层析流动相:
极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统;极性较大的用甲醇:氯仿系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系统;拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸
一般都是利用极性相似相容原理,看流动相与固定相的极性,大部分是固定相的极性小于流动相,然后流动相的极性与所要洗脱的物质极性比较接近,从而将物质洗脱下来。

阳离子交换剂层析洗脱顺序?

阳离子交换柱层析的洗脱顺序是先酸、后中性、然后再碱性,阳离子交换柱层析的洗脱需要用到离子交换剂,阳离子交换柱一般都是使用HCL溶液洗脱。
阳离子交换柱层析的原理
离子交换柱层析是使用离子交换剂(一种具有离子交换特性的物质)作为固定相,用于与流动相中的特定离子进行可逆交换,从而分离离子型混合物的层析方法
离子交换柱层析主要依赖于电荷之间的相互作用,并利用带电分子的电荷之间的细微差异进行分离。它具有很高的分离能力。离子交换柱层析广泛用于生物聚合物的分离,中间纯化和纯化过程中,因为几乎所有生物聚合物都是极性的并且可以带电荷。
离子交换剂的类型
将带电的活性基团引入惰性载体
取决于活性官能团的不同电荷的特性
阳离子交换剂
与带负电荷的阳离子交换
阴离子交换剂
带正电并交换阴离子
阴离子交换树脂对化学物质和热的稳定性不如阳离子交换树脂。
阳离子交换树脂的洗脱顺序:
用于水处理的阳离子交换柱层析的洗脱顺序:酸lt中性lt碱性。
阳离子交换树脂的洗脱顺序主要与树脂的亲和力有关,最重要的是静电吸引,其次是疏水相互作用。
树脂颗粒越大,就需要更多的洗脱液才可达到洗脱效果。
在稀溶液中,树脂上的电荷越高,树脂的亲和力越高。
树脂的洗脱与溶液中的离子浓度有关,浓度越低,洗脱就越容易,浓度越高,洗脱就越困难。
阳离子交换树脂通常使用盐酸溶液作为洗脱剂,但是阴离子交换树脂具有三种洗脱剂:盐酸溶液,氯化钠和氢氧化钠溶液。三种都可以用作阴离子树脂的洗脱液,对于某些具有相似分配系数的离子,可以使用含有有机络合剂或有机溶剂的洗脱液。这样可以有效地提高选择性。
阳离子交换树脂可用HCL溶液洗脱。用HCl溶液洗脱后,阳离子树脂可转化为氢树脂,阴离子交换树脂可使用NaCl或NaOH溶液作为洗脱剂,并可转化为氯树脂或氢氧化物。树脂打字后,使用HCL溶液,NaCl或NaOH溶液作为洗脱液,树脂再生过程完成,不需要再生,并且即使在用纯水清洗后也可以使用,因此非常方便。