荧光标记的常用方法
pcr荧光平行是横着还是竖着？
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It 水平的
它通过荧光染料或荧光标记的特异性探针追踪PCR产物，实时在线监测反应过程，并能结合相应的软件对产物进行分析，计算出待测样品模板的初始浓度。
merge荧光染料有哪些？
免疫荧光技术中常用的荧光染料
FITC(异硫氰酸荧光素):绿色530纳米
PE(藻红蛋白):橙色575nm。
PerCP(甲藻叶绿素蛋白):深红色675纳米。
PI(碘化丙锭):橙红色620纳米
488nm波长氩离子激光器的激发
别藻蓝蛋白:红色660纳米
由630nm波长的氦氖激光或红色二极管激光激发。
Cy3:激发波长为488nm，最大发射波长为570nm。
Cy5:激发波长为633/635nm，最大发射波长为670nm。
标记基因的筛选原理？
标记基因是具有已知功能或序列的基因，能起到特异标记的作用。在基因工程意义上，它是重组DNA载体的重要标志，通常用于检验转化是否成功；在基因定位的意义上，它是一种标记目的基因的工具，通常用于检测目的基因在细胞中的位置。
2.如何筛选标记基因？
标记基因可以是特定的抗性基因，成功导入并表达该标记基因的生物具有相应的抗性，从而判断基因表达载体是否成功导入细胞。此外，标记基因也可以是用放射性同位素标记的基因，通过检测放射性可以判断基因表达载体是否成功导入受体细胞。
在基因表达载体中，不同的构建载体的目的需要不同的标记基因。一些标记基因是质粒固有的，而另一些是添加的。通常，质粒载体在基因组中具有1-2个筛选标记，这为宿主提供了易于检测的表型特征。
高中生物选修3教材中，基因工程题目常用的标记基因都是存在于质粒中的抗性基因，比如四环素抗性基因。将靶基因连接到含有标记基因的质粒上，然后将重组质粒导入受体细胞。理论上，受体细胞(如大肠杆菌)对四环素有抗性。当人们使用选择性培养基(例如含有四环素的培养基)来培养受体细胞时，可以认为能够在培养基中存活的受体细胞已经成功引入了重组质粒，从而选择已经成功引入重组质粒的细胞。
这里需要注意的是，标记基因只是筛选成功导入基因表达载体的受体细胞的工具，只是间接证明含有目的基因的基因表达载体被成功导入，并不能为目的基因是否成功融合入受体细胞提供直接证据。因此，在选择性培养基中，能存活的细胞只能被证明。带有标记基因的质粒存在于Ming细胞中，可以 t直接表明靶基因存在于质粒上，即细胞可能不表达所需的细胞产物。接下来要进行目的基因的检测和鉴定，从分子水平到个体水平逐步检测存活的受体细胞，从而获得目的基因成功导入和表达的直接证据。