提取rna浓度怎么计算

知道OD260怎么算RNA的浓度呀?提取的RNA总量怎么算?

知道OD260怎么算RNA的浓度呀?提取的RNA总量怎么算?

一般按照1OD40μg/ml 计算RNA浓度。
你将2μl样品稀释到200μl,稀释倍数就是100倍,所以你提取的RNA浓度0.154×100×40μg/ml616μg/ml。如果你RNA的量是50μl,所以你提取的RNA总量616μg/ml×50/1000ml30.8μg。

提rna浓度低对逆转录和pcr有影响吗?

肯定是浓度越高越好。浓度越高一般RNA的质量也越高。浓度低不代表RNA质量就差,你可以看一下260/280和 260/230的值,达标的话,往下做都不会有问题的。要是有问题,你也可以尝试着往下做做看,有时候能P出来的。

dna样本浓度计算公式?

将待测DNA溶液作适当稀释,选用光程为0.5cm的石英比色杯,在紫外分光光度计上测定OD260和OD280的值,按以下公式计算DNA浓度。
1000ng/1000ul 1ug/ml
据朗波-比尔光吸收定律A=-lgT=εbc知,c=A/εb,而b通常为1cm,所以,通常以1OD值相当于50μg/mL双螺旋DNA,或40μg/mL单螺旋DNA(或RNA),或20μg/mL寡核苷酸计算。

dna样品浓度计算公式?

1000ng/1000ul 1ug/ml
据朗波-比尔光吸收定律A=-lgT=εbc知,c=A/εb,而b通常为1cm,所以,通常以1OD值相当于50μg/mL双螺旋DNA,或40μg/mL单螺旋DNA(或RNA),或20μg/mL寡核苷酸计算。

质粒提取的注意事项?

1、利用氯霉素抑制染色体的复制,而不抑制质粒的复制这一特点,在低拷贝质粒(如pUC19)的培养过程中添加氯霉素可以大大提高得率。
2、RNA 的去除,首先是使用 RNase 消化。在溶液 I 中加入高浓度的 RNase A (100ug/ml),或者用含 25ug RNase A/ml TE 溶解抽提好的质粒,都可以降低 RNA 残留,但都不能彻底去除。
3、蛋白质的去除,主要是靠不溶解的 K-SDS-蛋白质复合物的形成。虽然将中和后的体系置于 4C 一段时间,可以形成更多的该不溶复合物,从而使蛋白质残留更少,但实践证明这样做并不是必须的,除非是大量抽提。 首先,质粒的提取可分为质粒小提、质粒中提、质粒大提。目前大多数实验室都选用试剂盒进行提取,可以根据实验的不同需求,选择相应的试剂盒。 质粒小提主要用于用于大肠杆菌中质粒DNA的小量提取,获得的质粒可以用于常规的载体构建,一般适用于5ml以下菌液。 而质粒中提,在小提的基础上可以进一步去除菌液中的内毒素,获得的质粒可以用于细胞转染,常规需要菌液量为10-15ml。质粒大提与中提方法相同,可一次抽提100ml-300ml菌液获得大量质粒。