微生物检测方法的验证
微生物方法学验证需要三批样品吗？
微生物方法学验证需要三批样品吗？
通常在检验其他项目时，研究微生物的方法学，然后对三批样品进行全检。既然是微生物检验，就要求样品在车间生产，在一定的环境控制条件下产生的样品不能满足普通实验室样品的要求。
微生物是否产淀粉酶的鉴定实验？
以淀粉为唯一碳源(合成培养基)，接种你要鉴定的微生物，如果能生长，估计能产淀粉酶。
将碘溶液倒入有菌落的平板中，观察菌落周围是否有透明圈。如果有透明圈，就可以确认淀粉酶分泌了。如果看不到淀粉环，此时菌落一般不是很大，所以怀疑淀粉酶是非分泌型，多位于薄膜外围，需要破壁后提取淀粉酶进行淀粉溶出验证试验。常用淀粉环法。
检测培养基是否被污染的方法有？
常用的检测方法有培养、荧光染色、PCR和电镜观察。
培养是最可靠、成本最低的方法，但培养周期长，常用于细胞和临床治疗细胞中支原体的检测。
荧光染色法是用特定的荧光染料(Hoechst 33258)染色后在荧光显微镜下检测。荧光染料(Hoechst 33258)是一种能与DNA特异性结合的物质。如果检测样本被支原体污染，附着在细胞表面、分散在细胞间的支原体DNA会被染色，在荧光显微镜下可以看到。
PCR检测就是针对支原体的特定序列设计引物。当有支原体污染时，会通过PCR扩增特异性复制目标DNA，然后通过琼脂糖电泳进行检测，结果为阳性。相反，当没有支原体污染时，PCR无法扩增，所以琼脂糖电泳不会出现条带，而电镜观察法是利用电镜的超强扩增功能，直接观察培养细胞中的支原体污染。
本文主要介绍荧光染色法检测培养细胞中的支原体，具体检测步骤如下::。
(1)细胞爬壁培养将待测:细胞培养至传代水平，消化后接种于含载玻片的细胞平板中，培养至60%-70%汇合，然后检测。
(2)冲洗:吸出细胞板中的培养液，取出载玻片，用PBS轻轻冲洗。
(3)固定:，加入适量固定液，室温放置10分钟。
(4)用PBS轻轻冲洗: 3次。
(5)向染色的:中加入适量荧光染料(Hoechst 33258)工作溶液，并在室温下放置10分钟。
(6)用PBS轻轻冲洗: 3次。
(7)显微镜下观察:擦干载玻片，滴上反荧光猝灭剂，在荧光显微镜下观察并拍照。