描述琼脂糖凝胶电泳的操作流程
琼脂糖凝胶电泳怎样检测DNA?
琼脂糖凝胶电泳怎样检测DNA?
如果DNA出现降解或者是混有其他杂质,例如蛋白质、RNA的话,那么琼脂糖凝胶就能够检测得到DNA的质量。
标准主要是通过观察电泳条带的亮度,通过亮度就可以粗略地计算出DNA条带的含量。如果DNA出现损失,对应的条带就会变暗或者是消失。
线性的单一DNA样品一般是单条带,质粒的话可能会有2-3条带.
如果条带变宽、变暗、或者变成弥散的DNA条带,表示DNA非特异的降解.
如果条带变成多条,表示可能被酶切.如果质粒被单酶切,可能变成一条亮带.
如果有蛋白质污染,上样孔可能发亮.如果有RNA污染,可能小分子量部分会有弥散.
为什么琼脂糖凝胶电泳条带大分子先跑出来?
小分子先跑出来
应该是小分子条带离点样孔越远 而大分子离点样孔的距离近
但是 估计你拍照的时候是倒着看的 所以。。。
各位帮忙看看,PCR后跑的琼脂糖凝胶电泳图,条带不清晰原因是什么?
那要看你的目的基因具体的来源,大小级别的特性。
TAE和别的缓冲液什么的,也有些影响,还有就是胶浓度,跑胶时候的电压控制什么的。
琼脂糖凝胶电泳图怎么看啊?
要看有没有M对照,然后观察在同一泳道上共有几条 亮带,分别标记a b c,泳道也要标记123456等序号,以方便分析,
要看你提取的是什么,一般做实验是提取DNA,可以分析它的分子大小,若在实验中没有加入RNase,可能在最下端出现白色亮带,为RNA
PCR扩增目的基因以后,怎么用琼脂糖电泳回收及纯化呢?希望高手指教?
pcr产物经琼脂糖凝胶电泳纯化回收后,纯化产物再次跑电泳,有时会出现电泳位置在marker上的变化。
1.可能是marker的问题,有时候marker就是不太准。
2.pcr产物在琼脂糖电泳时,看上去是单一的条带,有时候其实是混杂的条带,所有切胶回收再跑电泳,有时候会出现杂带。另外,由于pcr产物带较宽,纯化后的产物带较窄。如果出现偏差较大的,可能是扩增产物的错误,或者重新电泳。