目前常用的液相色谱柱

层析柱和色谱柱的区别?

层析柱和色谱柱的区别?

1.压力

液相色谱柱(尤其是分析型高效液相色谱):压力比较高,一般10-20Mpa。

色谱柱:通常在常压下,或使用真空泵(约0.1Mpa)。

2.包装

液相色谱柱:小粒径(常规5-20um)

色谱柱的:粒径大。

3.分离度

根据第二项,粒径越小,单位长度的理论塔板数越高。

液相色谱柱:分辨率优于色谱柱。

4.效率

液相色谱柱:分离速度快,一般在一小时以内。

色谱柱的:分离时间很长,超过一个小时。

液相色谱简称?

HPLC是高效液相色谱的缩写。它是色谱法的分支之一,又称高压液相色谱法、高速液相色谱法、高分辨率液相色谱法和现代柱色谱法。

高效液相色谱以液体为流动相,利用高压灌注系统将不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂和缓冲溶液等流动相泵入装有固定相的色谱柱中。柱内组分分离后,进入检测器进行检测,从而实现对样品的分析。

液相色谱仪最常用的试剂?

流动相试剂的选择

1.色谱纯度。液相色谱仪使用的试剂必须具有色谱纯度,使用前需要通过0.45um或0.22um的微孔滤膜过滤,除去试剂中的细小颗粒和其他杂质,避免残留在溶剂中的杂质在色谱柱内长期积累,降低柱效和寿命。

2.粘度。通常,流动相的粘度应小于2cp。如果使用高粘度溶剂,会增加柱压,不利于分离。常用的低粘度溶剂有乙腈、丙酮、乙醇等。

3.溶解性。溶剂必须对待测样品具有合适的极性和良好的选择性,并符合相似相容的原则,以避免样品在体系中沉积,特别是在色谱柱中,随着时间的推移会降低柱效。

4.溶剂应与检测器匹配。对于紫外吸收检测器,应注意检测器的波长比溶剂的紫外截止波长长。截止波长是指某一波长,超过该波长,紫外检测器几乎没有响应或没有响应。对于差示检测器,要求选择与组分折光率相差较大的溶剂作为流动相,以达到最佳灵敏度。

5.缓冲盐和ph .反相色谱分离弱酸(3≤pKa≤7)或弱碱(7≤pKa≤8)时,抑制样品靶标解离,增加靶标在固定相上的保留,改善峰形的技术称为反相离子抑制。一般来说,当样品溶液呈酸性时,流动相中会加入少量的甲酸、乙酸或磷酸,以提高液相的分离度,改善峰形,但必须注意流动相的pH值在色谱柱的容许PH值范围内。当样品溶液为碱性时,情况正好相反。。pH值可以根据目标的pKa来确定,缓冲盐的种类可以根据pH值来选择,常用的缓冲盐溶液有醋酸铵、磷酸盐、三乙胺等。