如何获取目的基因三个方法
“基因过表达”的原理步骤和应用是什么？
“基因过表达”的原理步骤和应用是什么？
基因过表达的基本原理是通过人工构建的方式在目的基因上游加入调控元件，使基因可以在人为控制的条件下实现大量转录和翻译，从而实现基因产物的过表达。基因过表达的步骤是：
1，构建克隆。将目的基因连接在特定的载体上，载体种类依据表达系统差异而不同。在载体上一般含有增强基因转录的promoter，不同系统中采用的promoter完全不同。
2，将克隆导入表达细胞中。在大肠杆菌，酵母和哺乳动物细胞中，构建的外源质粒直接导入细胞即可，这个过程称为转化或转染。对于昆虫表达系统，构建的质粒还需要先转座成为杆状病毒基因组才能用于转染。基因过表达的应用：大肠杆菌表达系统，酵母表达系统，昆虫表达系统，哺乳动物细胞表达系统和体外翻译系统（无细胞体系）。
在基因工程中，重组质粒（运输载体）上的启动子来自哪里？
启动子来自目的基因，启动子的作用是负责启动转录，在编码区开始转录，当遇到终止子时转录停止，转录出来的mRNA再进行剪接（剪接时剪掉内含子，拼接外显子），然后形成成熟的mRNA,再进行翻译过程，mRNA上的起始密码子负责启动翻译过程，终止密码子负责终止翻译过程。
基因工程中载体，目的基因，受体细胞有什么区别？
目的基因一般是受体细胞不具有的,受体细胞基因缺陷的例外,运载体一般是环状DNA,具有标记基因,至少有两对启动子,切割点也不能少,受体细胞没有什么限制,动物细胞用显微注射技术,植物细胞采用农杆菌转化法,基因枪法,还有我国发明的花粉管通道法,微生物采用钙离子处理法。知识有限,见谅
目的基因的检测与鉴定中1.为什么要检测目的基因是否转录出mRNA？2.为什么有杂交带就说明成功？3.~~？
1 检测mRNA可以确定目的基因的转录水平。假如没有检测到蛋白水平，就可知道是在转录还是翻译的过程中出现了问题。同时也可以结合翻译水平得到蛋白的表达效率。
2 有杂交带说明产物表达了，即克隆构建成功。
3 抗原抗体杂交的原理是依据抗原抗体的特异性结合反应。至于为什么会结合，是因为抗体的产生是在动物或者人体内，当有相应抗原刺激（这里可以视作你的目的蛋白），机体中的抗体基因会在抗原的刺激之下，产生重排，表达出特定的抗体蛋白，其可变区域具有和该抗原互补的结构域，具有和抗原特定表位的高亲和力。所以能够结合。