血清醋酸纤维素薄膜电泳实验结论
用醋酸纤维素薄膜作为电泳的支持物有何优点?
用醋酸纤维素薄膜作为电泳的支持物有何优点?
醋酸纤维素
是指以醋酸为溶剂,醋酸酐为乙酰化剂,在催化剂的作用下酯化得到的一种热塑性树脂。作为一种多孔膜材料,它具有选择性高、透水性大、加工简单等特点。
醋酸纤维素的用途很多,一般来说可以用来做药物的肠溶衣,醋酸纤维素滤膜等等。也可用于制备溶剂型胶粘剂,粘接玻璃、玩具等塑料制品。
不同种类的醋酸纤维素在选择不同的添加剂后,应用更加广泛。如香烟过滤嘴、塑料薄膜、车把、手柄、笔筒、录音磁带、胶片、x光片等。全部来自醋酸纤维素,甚至血液透析用的材料,血液滤过膜,人工肾膜都有他们的存在。
醋酸脱色原理?
氨基黑10B用醋酸脱色的原理是什么?氨基黑10B-使用说明
主要用于聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶和硝酸纤维素膜上的蛋白质染色。电泳后,建议将蛋白质固定在凝胶上。用在7% (v/v)乙酸溶液中的0.1%氨基黑10B将胶染色至少2小时,然后用7% (v/v)乙酸溶液脱色。检测灵敏度约为考马斯亮蓝R250的20%。
储运:易吸潮,密封储存。
wb实验的原理和步骤?
WB实验的基本原理:
蛋白质Western Blot是将蛋白质转移到膜上,然后用抗体检测的方法。基因表达的最终结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此,蛋白质的检测是基因表达的主要标志,检测蛋白质的方法很多。除了ELISA,也可以使用类似于DNA和RNA的印迹方法。
它类似于Southern或Northern杂交,但Western Blot采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,检测的对象是蛋白质探针和探针是抗体,而 "颜色发展与应用使用标记的第二抗体。
将PAGE分离的蛋白质样品转移到固相载体(如硝酸纤维素膜)上,固相载体以非共价键的形式吸附蛋白质,电泳分离的多肽种类和生物活性可保持不变。以固相载体上的蛋白质或多肽为抗原,与相应的抗体反应,再与酶或同位素标记的第二抗体反应,通过电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白质成分,通过底物显色或放射自显影进行检测。这项技术也广泛用于检测蛋白质水平的表达。
三、WB实验步骤
(1)试剂的准备
(2)蛋白质样品的制备
(3)蛋白质含量的测定
(4) SDS-PAGE电泳
(5)转移膜
(6)免疫反应
(7)化学发光、显影和固定
(8)凝胶图像分析