最简单的方法测定dna rna
DNA的结构相关计算公式及其推导过程
DNA的结构相关计算公式及其推导过程
50μg/mL是双链DNA的,40μg/mL是RNA,37μg/mL是单链DNA以及30μg/mL的寡核苷酸,因此若是测定RNA的含量,50应该换为40.
培训时,老师讲:光程是1厘米的比色杯,A=1时,双链DNA的含量是50μg/mL.
在这里,我们可以把公式中的50看作一个常数.不用理会就说是常数.
公式
DNA含量(ug)
50
X(260nm的读数)X 稀释倍数
DNA的复制过程分析?
DNA复制时,往往先由RNA聚合酶在DNA模板上合成一段RNA引物,再由聚合酶从RNA引物3’端开始合成新的DNA链。
对于前导链来说,这一引发过程比较简单,只要有一段RNA引物,DNA聚合酶就能以此为起点,一直合成下去。
对于后随链,引发过程较为复杂,需要多种蛋白质和酶参与。后随链的引发过程由引发体来完成。引发体由6种蛋白质构成,预引体或引体前体把这6种蛋白质结合在一起并和引发酶或引物过程酶进一步组装形成引发体。引发体似火车头一样在后随链分叉的方向前进,并在模板上断断续续的引发生成滞后链的引物RNA短链,再由DNA聚合酶III作用合成DNA,直至遇到下一个引物或冈崎片段为止。
用同位素标记法如何来区分DNA与RNA?最好标记什么?它们的组成元素都一样呀?
用同位素标记尿嘧啶,之后检测到有放射性的是RNA,没有的是DNA
如何检测目的基因是否转录?
可以杂交的,DNA中的一条链能跟RNA杂交 .RNA的碱基主要有4种,即A腺嘌呤,G鸟嘌呤,C胞嘧啶,U尿嘧啶.DNA的碱基主要有4种,即A腺嘌呤,G鸟嘌呤,C胞嘧啶,T胸腺嘧啶同样遵循碱基互补配对规律A和U,G和C,T和A检测用的dna应该是目的基因,假若与RNA完全吻合,就是没有出现弯曲,就证明结论
DNA测序技术有哪些?
DNA测序(DNA sequencing,或译DNA定序),是RNA测序则通常将RNA提取后,反转录为DNA后使用DNA测序的方法进行测序。应用最广泛的是由Frederick Sanger发明的Sanger双脱氧链终止法,DNA sequencing technology,在分子生物学研究中,DNA的序列分析是进一步研究和改造目的基因的基础。用于测序的技术主要有Sanger等(1977)发明的双脱氧链末端终止法和Maxam和 Gilbert(1977)发明的化学降解法。
这二种方法在原理上差异很大,但都是根据核苷酸在某一固定的点开始,随机在某一个特定的碱基处终止,产生 A,T,C,G四组不同长度的一系列核苷酸,然后在尿素变性的PAGE胶上电泳进行检测,从而获得DNA序列。